Ion Lemah CM-Kromatografi Membran Tukar
Kromatografi Membran Penukar Kation Kuat SP Perkenalan Produk 1. Ikhtisar Kromatografi penukar kation kuat SP adalah teknik pemurnian di mana gugus asam sulfonat diikat ke membran untuk membentuk modul kromatografi. Pemisahan dicapai berdasarkan perbedaan...
perkenalan produk
Pengenalan Produk Kromatografi Membran Penukar Kation Kuat SP
1. Ikhtisar
Kromatografi penukar kation kuat SP adalah teknik pemurnian di mana gugus asam sulfonat diikatkan pada membran untuk membentuk modul kromatografi. Pemisahan dicapai berdasarkan perbedaan sifat muatan dan jumlah muatan biomolekul yang berbeda. Karena sebagian besar makromolekul biologis mengandung gugus karboksil atau hidroksil, sifat dan kuantitas muatannya dapat diubah dengan menyesuaikan nilai pH larutan buffer. Setelah biomolekul berikatan dengan modul membran yang membawa muatan berlawanan, kekuatan ionik atau pH fase gerak diubah untuk mengelusi komponen yang terikat lemah terlebih dahulu, diikuti oleh komponen yang terikat kuat, sehingga mencapai pemisahan yang efektif.

2. Keunggulan Produk
Cepat dan Efisien Kapasitas pengikatan tinggi dapat dicapai pada laju aliran hingga 40 kali lebih cepat dibandingkan kromatografi resin tradisional. Dibandingkan dengan kromatografi berbasis resin konvensional, waktu proses menggunakan kromatografi membran dapat dikurangi hingga 30–40 kali lipat. Laju aliran operasi tipikal adalah sekitar 10 MV/menit.
2.2 Efisiensi Pengikatan Tinggi Kromatografi membran menunjukkan kapasitas pengikatan yang tinggi dan laju aliran yang tinggi pada penurunan tekanan yang rendah, memungkinkan biomolekul bermuatan ditangkap dalam sekali lintasan melalui modul.
2.3 Skalabel dan Fleksibel Rangkaian lengkap produk kromatografi membran dapat memenuhi beragam kebutuhan pemurnian biomolekul, yang mencakup aplikasi mulai dari pengembangan proses hingga produksi-skala besar. Desain kapsul memungkinkan pengoperasian-sekali pakai atau dapat dibersihkan dan digunakan kembali setelah prosedur pembersihan yang benar.
2.4 Peningkatan Produktivitas Desain yang ringkas meminimalkan jejak fasilitas. Dengan menghilangkan operasi seperti pengepakan kolom, pembersihan, validasi pembersihan, dan penyimpanan kolom, pemrosesan dapat dimulai setelah keseimbangan sederhana dengan buffer yang relatif lebih sedikit. Karena tidak diperlukan pengepakan, pembersihan, atau penyimpanan kolom, biaya tenaga kerja dapat dikurangi lebih dari 50%.


3 Parameter Teknis
3.1 Bahan Struktural
|
skala laboratorium |
skala kecil |
skala percontohan |
skala produksi |
|
|
volume membran |
0,2ml |
5ml |
140ml |
5L |
|
Struktur Pendukung Membran |
Polipropilena |
|||
|
perumahan membran |
Polipropilena |
|||
|
Oh cincin |
Silikon |
|||
3.2 Karakteristik Operasi
|
skala laboratorium |
skala kecil |
skala percontohan |
skala produksi |
|
|
volume membran |
0,2ml |
5ml |
400ml |
5L |
|
Laju aliran yang disarankan |
1-6ml/menit |
25-150ml/menit |
2-12L/menit |
25-150L/menit |
|
Suhu pengoperasian maksimum |
35 derajat |
|||
|
Tekanan operasi maksimum |
3bar (25 derajat) |
|||
|
Perbedaan tekanan maksimum |
3bar (25 derajat) |
|||
|
Kondisi penyimpanan |
20% edaripadaolaantrissolusi |
|||
Perbandingan menunjukkan bahwa masa pakai kromatografi membran SP sebanding dengan SP Sepharose 6FF.

Gambar 1. Perubahan Kapasitas Pengikatan Kromatografi Membran SP Setelah Beberapa Penggunaan Diuji dengan Lisozim
Selain itu, kami mengevaluasi kromatografi membran untuk efisiensinya dalam menghilangkan protein sel inang dan asam nukleat. Hasilnya adalah sebagai berikut:
|
|
DNA |
Profesi Kesehatan |
|||||
|
|
Pemulihan IgG |
Konten (pg/mg IgG) oleh RT PCR |
Faktor Penghapusan |
Konten (ng/mg IgG)oleh Elisa |
Faktor Penghapusan |
||
|
Berlari |
% |
Sebelum Membran Q |
Setelah Membran Q |
Catatan |
Sebelum Membran Q |
Setelah Membran Q |
Catatan |
|
1 |
96.4 |
423 |
3.6 |
2.07 |
7 |
4.3 |
0.21 |
|
2 |
97.4 |
438 |
4.3 |
2.01 |
7 |
4.7 |
0.17 |
|
3 |
94.1 |
513 |
5.8 |
1.95 |
6 |
2.3 |
0.42 |
|
4 |
96.2 |
32 |
0.8 |
1.60 |
6 |
3.2 |
0.27 |
|
5 |
96.3 |
45 |
1.9 |
1.37 |
8 |
3.4 |
0.37 |
|
6 |
96.7 |
158 |
2.4 |
1.82 |
8 |
3.5 |
0.36 |
|
7 |
96.4 |
267 |
2.6 |
2.01 |
9 |
6 |
0.18 |
|
8 |
96.8 |
298 |
3.6 |
1.92 |
9 |
7 |
0.11 |
|
9 |
97.9 |
746 |
9.8 |
1.88 |
4 |
1.5 |
0.43 |
|
10 |
96.2 |
39 |
3.2 |
1.09 |
4 |
1.4 |
0.46 |
Tabel 1. Laju Penghapusan DNA dan Protein Sel Inang pada CHO-Bahan IgG yang Diekspresikan Menggunakan Kromatografi Membran SP
Serangkaian percobaan menunjukkan bahwa kromatografi membran SP dapat secara efektif menghilangkan kontaminan sambil mempertahankan tingkat pemulihan IgG target yang tinggi.
Jika dibandingkan dengan kromatografi membran Gudiling SP dengan merk impor, data kapasitas pengikatannya adalah sebagai berikut:
|
Mengikatckapasitas (mg/mL) |
Sartorius |
MEMBOSANKAN |
Membimbing |
|
Lisozim |
25 |
32 |
29 |
|
Tripsin |
22 |
27 |
25 |
Tabel 2. Kinerja Kapasitas Pengikatan Berbagai Protein pada Produk Kami dan Merek Pesaing
Evaluasi keseluruhan menunjukkan bahwa kapasitas pengikatan kami sebanding dengan produk impor.

Gambar 2. Uji Kapasitas Pengikatan Modul Kromatografi Membran SP Menggunakan Standar Lisozim
Dibandingkan dengan kapasitas pengikatan dinamis dan produk impor, dipastikan bahwa sebagian besar protein target dapat ditangkap ketika lisozim dielusi dalam 190 mM NaCl.
Melalui kondisi elusi yang berbeda, kami menemukan bahwa profil elusi kromatografi membran mirip dengan gel agarosa, namun kemurnian protein bervariasi secara signifikan pada konsentrasi garam yang berbeda. Dalam penelitian dan pengembangan dan produksi sebenarnya, penting untuk menentukan secara kuantitatif kondisi elusi optimal untuk mendapatkan protein target dengan kemurnian tinggi.
4 Kasus Aplikasi Khas
Penghapusan DNA, virus, dan protein sel inang
Penangkapan plasmid, virus, protein, dan pemurnian oligonukleotida
Penghapusan pigmen dari kaldu fermentasi ragi dan-penangkapan protein berkapasitas tinggi
5 Prosedur Penggunaan
5.1 Persiapan dan Perakitan Peralatan:
5.1.1: Pasang modul kromatografi membran pada sistem kromatografi ÄKTA dengan mengikuti prosedur serupa dengan kolom resin, pastikan arah aliran sejajar dengan panah modul dan orientasi saluran masuk. Hubungkan modul menggunakan kunci Luer atau perlengkapan model penjepit-untuk integrasi yang aman ke dalam sistem.
5.1.2 Atur laju aliran umpan ke5–10 MV/mindan degas modul menggunakan buffer keseimbangan, memastikan limbah bebas dari gelembung udara. Setelah dihilangkan gasnya, sambungkan saluran keluar permeat ke sistem kromatografi.
5.2:Perawatan Pra-Penggunaan:
5.2.1:
Atur laju aliran umpan ke5–10 MV/mntdan melakukan pra{0}}perawatan dengan0,5 M NaOH untuk lebih dari 5 MV, memastikan membran mencapai keseimbangan penuh.
5.2.2: Pada laju aliran yang sama, lakukan pra-perlakuan dengan1 M NaCl untuk lebih dari 5 MVuntuk memastikan membran mencapai keseimbangan penuh.
5.3 Proses Kromatografi
5.3.1 Atur laju aliran umpan ke 5–10 MV/menit dan setimbangkan membran dengan buffer keseimbangan lebih dari 5 MV, hingga membran mencapai keseimbangan penuh.
5.3.2 Setelah pra-filtrasi 0,22 μm, masukkan sampel ke dalam membran sampai pemuatan sampel selesai atau kapasitas pengikatan kromatografi tercapai.
5.3.3 Cuci dengan buffer keseimbangan lebih dari 10 MV hingga sinyal UV kembali ke garis dasar.
5.3.4 Terapkan elusi gradien atau elusi bertahap sesuai dengan desain proses, dan kumpulkan fraksi sesuai kebutuhan.
5.4 Pasca CIP-Perawatan Penggunaan – Perangkat Kromatografi Membran CIP (Pembersihan di Tempat)
5.4.1 Atur laju aliran umpan ke 5–10 MV/menit dan lakukan pembersihan dengan NaOH 1 M selama lebih dari 10 MV, hingga sinyal UV berkurang hingga di bawah garis dasar.
5.4.2 Setelah bersirkulasi selama 30 menit, alihkan ke air cucian hingga pH mencapai 7–8, kemudian lanjutkan pembersihan dengan etanol 20% hingga konduktivitas hampir konstan.
5.5 Penyimpanan Kromatografi Membran
Setelah penggunaan dan penyelesaian CIP, modul membran dapat dilepas dan disimpan dengan merendamnya dalam etanol 20%, atau dapat disimpan dalam wadah pada suhu kamar dalam larutan yang mengandung etanol 20%. Larutan etanol 20% harus diperiksa dan diganti secara berkala.
6. Informasi pemesanan
Q Filter Kapsul Kromatografi Membran Penukar Anion Kuat
|
skala laboratorium |
skala kecil |
skala percontohan |
skala produksi |
|
|
Model Produk |
IEXQ0002ES |
IEXQ0050ES |
IEXQ0400ES |
IEXQ5000ES |
|
Volume Membran |
0,2ml |
5ml |
400ml |
5L |
Tag populer: cm ion lemah-kromatografi membran pertukaran, Cina, pemasok, produsen, pabrik, grosir, massal, dalam stok, sampel gratis
Anda Mungkin Juga Menyukai
Kirim permintaan












