Q Kromatografi Membran Anion Kuat
video
Q Kromatografi Membran Anion Kuat

Q Kromatografi Membran Anion Kuat

1.Ikhtisar Kromatografi penukar ion adalah teknik pemurnian yang memisahkan biomolekul berdasarkan perbedaan sifat muatan dan kuantitas muatannya. Karena sebagian besar makromolekul biologis mengandung gugus karboksil atau hidroksil, karakteristik muatan dan besarannya dapat disesuaikan...

perkenalan produk

product-800-800
1. Ikhtisar

Kromatografi penukar ion adalah teknik pemurnian yang memisahkan biomolekul berdasarkan perbedaan sifat muatan dan kuantitas muatannya. Karena sebagian besar makromolekul biologis mengandung gugus karboksil atau hidroksil, karakteristik muatan dan besarannya dapat disesuaikan dengan mengontrol nilai pH larutan buffer. Setelah biomolekul berikatan dengan media penukar anion atau kation yang bermuatan berlawanan, pemisahan dicapai dengan mengubah kekuatan ionik atau pH fase gerak, menyebabkan molekul yang terikat lemah terelusi terlebih dahulu, diikuti oleh molekul yang terikat kuat.

 

2. Keunggulan produk

2.1 Cepat dan efisien - mencapai kapasitas pengikatan tinggi pada laju aliran hingga 40 kali lebih cepat dibandingkan resin tradisional. Dibandingkan dengan kromatografi unggun dikemas, waktu proses menggunakan kromatografi membran berkurang 30–40 kali lipat. Laju aliran operasi tipikal adalah 10 MV/menit.

2.2 Efisiensi pengikatan yang tinggi - Kromatografi membran menunjukkan kapasitas pemuatan yang tinggi dan laju aliran yang tinggi dalam kondisi penurunan tekanan yang rendah, sehingga memungkinkan biomolekul bermuatan ditangkap dalam sekali lintasan.

2.3 Dapat diskalakan dan fleksibel - rangkaian lengkap produk kromatografi membran dapat memenuhi beragam kebutuhan pemurnian biomakromolekul, yang mencakup semua tahap mulai dari pengembangan proses hingga produksi skala besar-. Desain struktur tipe kapsul-mendukung pengoperasian-sekali pakai dan penggunaan kembali setelah dibersihkan.

2.4 Meningkatkan produktivitas - Desain ringkas meminimalkan jejak fasilitas. Dengan menghilangkan operasi pengepakan kolom, pembersihan, validasi pembersihan, dan penyimpanan kolom, proses ini memerlukan lebih sedikit buffer untuk keseimbangan dan dapat dilakukan secara langsung tanpa persiapan kolom. Biaya tenaga kerja dapat dikurangi hingga 50%.

 

3. Parameter teknis

3.1 Bahan struktural

 

skala laboratorium

skala kecil

skala percontohan

skala produksi

volume membran

0,2ml

5ml

140ml

5L

Struktur pendukung membran:

polipropilen (PP)

perumahan membran

polipropilen (PP)

Oh cincin

silikon

 

3.2 Karakteristik pengoperasian

 

skala laboratorium

skala kecil

skala percontohan

skala produksi

volume membran

0,2ml

5ml

400ml

5L

Laju aliran yang disarankan

1-6ml/menit

25-150ml/menit

2-12L/menit

25-150L/menit

Suhu pengoperasian maksimum

35 derajat

Tekanan operasi maksimum

3bar (25 derajat)

Perbedaan tekanan maksimum

3bar (25 derajat)

Kondisi penyimpanan:

Larutan berair etanol 20%.

 

Masa pakai kromatografi membran Q sebanding dengan kromatografi gel agarosa.

product-806-441

product-800-800
product-800-800

 

 

Gambar 1. Perubahan kapasitas pemuatan kromatografi membran setelah beberapa kali penggunaan dipantau oleh BSA

Selain itu, kami mengevaluasi efisiensi penghilangan kromatografi membran untuk protein sel inang dan asam nukleat. Hasilnya adalah sebagai berikut.

 

DNA

Profesi Kesehatan

 

Pemulihan IgG

Konten (pg/mg IgG) oleh RT PCR

Faktor Penghapusan

Konten (ng/mg IgG)oleh Elisa

Faktor Penghapusan

Berlari

%

Sebelum Membran Q

Setelah Membran Q

Catatan

Sebelum Membran Q

Setelah Membran Q

Catatan

1

96.7

423

1.2

2.55

7

4.8

0.16

2

97.4

438

1.3

2.53

7

4.9

0.15

3

94.7

513

1.3

2.60

6

1.9

0.50

4

95

32

0.9

1.55

6

4.2

0.15

5

96.3

45

1.1

1.61

8

5.2

0.19

6

96.5

158

0.7

2.35

8

6.2

0.11

7

96.4

267

1.9

2.15

9

7.2

0.10

8

96.8

298

2.3

2.11

9

8.2

0.04

9

97.1

746

1.5

2.70

4

2

0.30

10

96.6

39

1

1.59

4

1.5

0.43

Tabel 1. Laju penyisihan DNA dan protein sel inang pada bahan IgG yang diekspresikan CHO-menggunakan kromatografi membran Q

 

Serangkaian percobaan menunjukkan bahwa kromatografi membran Q dapat secara efektif menghilangkan kotoran sambil mempertahankan target perolehan IgG yang tinggi.

Selain itu, kami membandingkan kromatografi membran Gudiling dengan merek impor, dan data kapasitas pemuatannya adalah sebagai berikut:

Kapasitas pemuatan (mg/ml)

Sartorius

MEMBOSANKAN

Membimbing

BSA

29

60

45

MERUMPUT

25

40

35

Protein A

27

45

40

Tripsin

30

56

44

Tabel 2. Memuat kinerja berbagai protein pada produk kami dan produk pesaing

Evaluasi keseluruhan menunjukkan bahwa kapasitas pemuatan kami sebanding dengan produk impor,

product-1119-279

Gambar 2.Menggunakan modul kromatografi membran Q, BSA digunakan sebagai protein standar untuk mengevaluasi kapasitas pengikatan. Kapasitas pengikatan dinamis dibandingkan dengan produk impor. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sebagian besar protein target dapat ditangkap dan dielusi150 mM NaClketika menggunakan BSA sebagai protein model.

Melalui kondisi elusi yang berbeda, kami menemukan bahwa perilaku elusi kromatografi membran mirip dengan kromatografi gel agarosa. Kemurnian protein yang dielusi pada konsentrasi garam yang berbeda sangat bervariasi. Dalam pengembangan proses dan produksi sebenarnya, perlu ditentukan secara kuantitatif kondisi elusi optimal untuk mendapatkan protein target dengan kemurnian tinggi.

 

4.Kasus Aplikasi Khas

Penghapusan DNA, virus, protein sel inang (HCP), dan endotoksin

Penangkapan plasmid, virus, dan protein, serta pemurnian oligonukleotida

 

5. Prosedur Operasional

5.1: Persiapan dan Perakitan Peralatan:

5.1.1: Sistem kromatografi AKTA: Pasang modul kromatografi membran dengan cara yang mirip dengan kolom kemasan. Pastikan arah panah pada modul konsisten dengan arah aliran umpan. Hubungkan sistem menggunakan konektor Luer atau fitting Tri-Clamp.

5.1.2 Atur laju aliran masuk ke 5–10 MV/menit dan gunakan buffer keseimbangan untuk mengeluarkan udara dari sistem. Setelah memastikan tidak ada gelembung udara pada aliran keluar, sambungkan saluran keluar permeat ke sistem kromatografi.

5.2:Perawatan Pra-penggunaan:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV untuk memastikan membran mencapai keseimbangan.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV untuk memastikan membran mencapai keseimbangan.

5.3 Proses Kromatografi

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV hingga membran mencapai kesetimbangan.

5.3.2 Setelah sampel disaring terlebih dahulu melalui filter 0,22 μm, masukkan sampel ke dalam kolom hingga seluruh sampel terisi atau kapasitas pengikatan kromatografi tercapai.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV hingga sinyal UV turun ke garis dasar.

5.3.4 Lakukan elusi gradien atau linier sesuai dengan protokol yang dirancang, dan kumpulkan pecahan sesuai kebutuhan.

5.4 Perawatan Pasca-penggunaan CIP – CIP Perangkat Kromatografi Membran

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV hingga sinyal UV turun di bawah garis dasar.

5.4.2 Setelah bersirkulasi selama 30 menit, alihkan ke pencucian air hingga pH mencapai 7–8, kemudian alihkan ke etanol 20% dan lanjutkan pencucian hingga konduktivitas stabil.

5.5, Penyimpanan Kromatografi Membran:

Setelah penggunaan dan penyelesaian CIP, modul membran dapat dibongkar dan disimpan dalam etanol 20%, atau disimpan online pada suhu kamar dalam etanol 20%. Larutan etanol harus diganti dan diperiksa secara berkala.

 

6. Informasi Pemesanan

Q Anion Kuat-Filter Kapsul Kromatografi Membran Tukar

 

skala laboratorium

skala kecil

skala percontohan

skala produksi

Model Produk

IEXQ0002ES

IEXQ0050ES

IEXQ0400ES

IEXQ5000ES

volume membran

0,2ml

5ml

400ml

5L

Tag populer: q kromatografi membran anion kuat, Cina, pemasok, produsen, pabrik, grosir, massal, dalam stok, sampel gratis

Berikutnya: Tidak

Anda Mungkin Juga Menyukai

(0/10)

clearall