Q Kromatografi Membran Anion Kuat
1.Ikhtisar Kromatografi penukar ion adalah teknik pemurnian yang memisahkan biomolekul berdasarkan perbedaan sifat muatan dan kuantitas muatannya. Karena sebagian besar makromolekul biologis mengandung gugus karboksil atau hidroksil, karakteristik muatan dan besarannya dapat disesuaikan...
perkenalan produk

1. Ikhtisar
Kromatografi penukar ion adalah teknik pemurnian yang memisahkan biomolekul berdasarkan perbedaan sifat muatan dan kuantitas muatannya. Karena sebagian besar makromolekul biologis mengandung gugus karboksil atau hidroksil, karakteristik muatan dan besarannya dapat disesuaikan dengan mengontrol nilai pH larutan buffer. Setelah biomolekul berikatan dengan media penukar anion atau kation yang bermuatan berlawanan, pemisahan dicapai dengan mengubah kekuatan ionik atau pH fase gerak, menyebabkan molekul yang terikat lemah terelusi terlebih dahulu, diikuti oleh molekul yang terikat kuat.
2. Keunggulan produk
2.1 Cepat dan efisien - mencapai kapasitas pengikatan tinggi pada laju aliran hingga 40 kali lebih cepat dibandingkan resin tradisional. Dibandingkan dengan kromatografi unggun dikemas, waktu proses menggunakan kromatografi membran berkurang 30–40 kali lipat. Laju aliran operasi tipikal adalah 10 MV/menit.
2.2 Efisiensi pengikatan yang tinggi - Kromatografi membran menunjukkan kapasitas pemuatan yang tinggi dan laju aliran yang tinggi dalam kondisi penurunan tekanan yang rendah, sehingga memungkinkan biomolekul bermuatan ditangkap dalam sekali lintasan.
2.3 Dapat diskalakan dan fleksibel - rangkaian lengkap produk kromatografi membran dapat memenuhi beragam kebutuhan pemurnian biomakromolekul, yang mencakup semua tahap mulai dari pengembangan proses hingga produksi skala besar-. Desain struktur tipe kapsul-mendukung pengoperasian-sekali pakai dan penggunaan kembali setelah dibersihkan.
2.4 Meningkatkan produktivitas - Desain ringkas meminimalkan jejak fasilitas. Dengan menghilangkan operasi pengepakan kolom, pembersihan, validasi pembersihan, dan penyimpanan kolom, proses ini memerlukan lebih sedikit buffer untuk keseimbangan dan dapat dilakukan secara langsung tanpa persiapan kolom. Biaya tenaga kerja dapat dikurangi hingga 50%.
3. Parameter teknis
3.1 Bahan struktural
|
skala laboratorium |
skala kecil |
skala percontohan |
skala produksi |
|
|
volume membran |
0,2ml |
5ml |
140ml |
5L |
|
Struktur pendukung membran: |
polipropilen (PP) |
|||
|
perumahan membran |
polipropilen (PP) |
|||
|
Oh cincin |
silikon |
|||
3.2 Karakteristik pengoperasian
|
skala laboratorium |
skala kecil |
skala percontohan |
skala produksi |
|
|
volume membran |
0,2ml |
5ml |
400ml |
5L |
|
Laju aliran yang disarankan |
1-6ml/menit |
25-150ml/menit |
2-12L/menit |
25-150L/menit |
|
Suhu pengoperasian maksimum |
35 derajat |
|||
|
Tekanan operasi maksimum |
3bar (25 derajat) |
|||
|
Perbedaan tekanan maksimum |
3bar (25 derajat) |
|||
|
Kondisi penyimpanan: |
Larutan berair etanol 20%. |
|||
Masa pakai kromatografi membran Q sebanding dengan kromatografi gel agarosa.



Gambar 1. Perubahan kapasitas pemuatan kromatografi membran setelah beberapa kali penggunaan dipantau oleh BSA
Selain itu, kami mengevaluasi efisiensi penghilangan kromatografi membran untuk protein sel inang dan asam nukleat. Hasilnya adalah sebagai berikut.
|
|
DNA |
Profesi Kesehatan |
|||||
|
|
Pemulihan IgG |
Konten (pg/mg IgG) oleh RT PCR |
Faktor Penghapusan |
Konten (ng/mg IgG)oleh Elisa |
Faktor Penghapusan |
||
|
Berlari |
% |
Sebelum Membran Q |
Setelah Membran Q |
Catatan |
Sebelum Membran Q |
Setelah Membran Q |
Catatan |
|
1 |
96.7 |
423 |
1.2 |
2.55 |
7 |
4.8 |
0.16 |
|
2 |
97.4 |
438 |
1.3 |
2.53 |
7 |
4.9 |
0.15 |
|
3 |
94.7 |
513 |
1.3 |
2.60 |
6 |
1.9 |
0.50 |
|
4 |
95 |
32 |
0.9 |
1.55 |
6 |
4.2 |
0.15 |
|
5 |
96.3 |
45 |
1.1 |
1.61 |
8 |
5.2 |
0.19 |
|
6 |
96.5 |
158 |
0.7 |
2.35 |
8 |
6.2 |
0.11 |
|
7 |
96.4 |
267 |
1.9 |
2.15 |
9 |
7.2 |
0.10 |
|
8 |
96.8 |
298 |
2.3 |
2.11 |
9 |
8.2 |
0.04 |
|
9 |
97.1 |
746 |
1.5 |
2.70 |
4 |
2 |
0.30 |
|
10 |
96.6 |
39 |
1 |
1.59 |
4 |
1.5 |
0.43 |
Tabel 1. Laju penyisihan DNA dan protein sel inang pada bahan IgG yang diekspresikan CHO-menggunakan kromatografi membran Q
Serangkaian percobaan menunjukkan bahwa kromatografi membran Q dapat secara efektif menghilangkan kotoran sambil mempertahankan target perolehan IgG yang tinggi.
Selain itu, kami membandingkan kromatografi membran Gudiling dengan merek impor, dan data kapasitas pemuatannya adalah sebagai berikut:
|
Kapasitas pemuatan (mg/ml) |
Sartorius |
MEMBOSANKAN |
Membimbing |
|
BSA |
29 |
60 |
45 |
|
MERUMPUT |
25 |
40 |
35 |
|
Protein A |
27 |
45 |
40 |
|
Tripsin |
30 |
56 |
44 |
Tabel 2. Memuat kinerja berbagai protein pada produk kami dan produk pesaing
Evaluasi keseluruhan menunjukkan bahwa kapasitas pemuatan kami sebanding dengan produk impor,

Gambar 2.Menggunakan modul kromatografi membran Q, BSA digunakan sebagai protein standar untuk mengevaluasi kapasitas pengikatan. Kapasitas pengikatan dinamis dibandingkan dengan produk impor. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sebagian besar protein target dapat ditangkap dan dielusi150 mM NaClketika menggunakan BSA sebagai protein model.
Melalui kondisi elusi yang berbeda, kami menemukan bahwa perilaku elusi kromatografi membran mirip dengan kromatografi gel agarosa. Kemurnian protein yang dielusi pada konsentrasi garam yang berbeda sangat bervariasi. Dalam pengembangan proses dan produksi sebenarnya, perlu ditentukan secara kuantitatif kondisi elusi optimal untuk mendapatkan protein target dengan kemurnian tinggi.
4.Kasus Aplikasi Khas
Penghapusan DNA, virus, protein sel inang (HCP), dan endotoksin
Penangkapan plasmid, virus, dan protein, serta pemurnian oligonukleotida
5. Prosedur Operasional
5.1: Persiapan dan Perakitan Peralatan:
5.1.1: Sistem kromatografi AKTA: Pasang modul kromatografi membran dengan cara yang mirip dengan kolom kemasan. Pastikan arah panah pada modul konsisten dengan arah aliran umpan. Hubungkan sistem menggunakan konektor Luer atau fitting Tri-Clamp.
5.1.2 Atur laju aliran masuk ke 5–10 MV/menit dan gunakan buffer keseimbangan untuk mengeluarkan udara dari sistem. Setelah memastikan tidak ada gelembung udara pada aliran keluar, sambungkan saluran keluar permeat ke sistem kromatografi.
5.2:Perawatan Pra-penggunaan:
5.2.1:
Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV untuk memastikan membran mencapai keseimbangan.
5.2.2:
At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV untuk memastikan membran mencapai keseimbangan.
5.3 Proses Kromatografi
5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV hingga membran mencapai kesetimbangan.
5.3.2 Setelah sampel disaring terlebih dahulu melalui filter 0,22 μm, masukkan sampel ke dalam kolom hingga seluruh sampel terisi atau kapasitas pengikatan kromatografi tercapai.
5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV hingga sinyal UV turun ke garis dasar.
5.3.4 Lakukan elusi gradien atau linier sesuai dengan protokol yang dirancang, dan kumpulkan pecahan sesuai kebutuhan.
5.4 Perawatan Pasca-penggunaan CIP – CIP Perangkat Kromatografi Membran
5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV hingga sinyal UV turun di bawah garis dasar.
5.4.2 Setelah bersirkulasi selama 30 menit, alihkan ke pencucian air hingga pH mencapai 7–8, kemudian alihkan ke etanol 20% dan lanjutkan pencucian hingga konduktivitas stabil.
5.5, Penyimpanan Kromatografi Membran:
Setelah penggunaan dan penyelesaian CIP, modul membran dapat dibongkar dan disimpan dalam etanol 20%, atau disimpan online pada suhu kamar dalam etanol 20%. Larutan etanol harus diganti dan diperiksa secara berkala.
6. Informasi Pemesanan
Q Anion Kuat-Filter Kapsul Kromatografi Membran Tukar
|
skala laboratorium |
skala kecil |
skala percontohan |
skala produksi |
|
|
Model Produk |
IEXQ0002ES |
IEXQ0050ES |
IEXQ0400ES |
IEXQ5000ES |
|
volume membran |
0,2ml |
5ml |
400ml |
5L |
Tag populer: q kromatografi membran anion kuat, Cina, pemasok, produsen, pabrik, grosir, massal, dalam stok, sampel gratis
Anda Mungkin Juga Menyukai
Kirim permintaan












